十一种酚类化合物的高效液相色谱测定方法研究

酚类化合物是广泛分布于植物之中的一类复杂的化合物，是人类食物中一种普遍存在的组分。酚类化合物包括酚酸、黄酮和其它化合物。其中，酚酸和黄酮类化合物均具有显著的生理和药理活性，对一些常见病、多发病有重要的生理作用。本论文结合离线柱前反应和流动相添加剂增敏等多种手段，建立了十一种酚类化合物的高效液相色谱分析方法。该研究对于一些中药材、中药制剂及蔬菜中酚类化合物的质量控制以及进一步拓宽高效液相色谱法的应用范围具有重要意义。全文共分四章，作者的主要工作有以下四点： 1、建立了测定双黄连注射液中咖啡酸和黄芩苷，半枝莲药材中原儿茶酸、p-香豆酸和木樨草素及杜仲叶中没食子酸、绿原酸、p-香豆酸、芦丁和槲皮素含量的HPLC方法。实验结果表明，双黄连注射液中咖啡酸和黄芩苷的回收率分别为99．7％和108．0％，相对标准偏差（RSD）分别为1．2％和1．6％；半枝莲药材中三种化合物的回收率均在95．3～106．4％之间，RSD均在1．5～5．6％之间；杜仲叶中五种酚类成分的回收率均在97．8～106．4％之间，RSD均在1．6～3．3％之间。该研究为双黄连注射液中咖啡酸和黄芩苷两种成分的同时测定、半枝莲药材和杜仲叶的进一步开发及内在质量控制提供了科学的依据。 2、建立了高效液相色谱-二极管阵列检测器-电化学检测器（HPLC-DAD-ECD）联用技术同时分离测定鱼腥草、小蓟、马齿苋和蒲公英等药食两用品中绿原酸、咖啡酸、阿魏酸、芦丁、槲皮素和木樨草素等含量的新方法。实验结果表明，六种酚类化合物标准曲线线性良好（r≥0．9996），回收率在94．0％～102．5％（RSD≤2．8％）之间。与HPLC-DAD法相比较，对于测定具有电化学活性的化合物，HPLC-ECD法更灵敏。与HPLC-DAD或HPLC-ECD单一方法相比较，HPLC-ECD-DAD法具有快速、简便和对多种化合物实现同时测定的优点。 3、采用离线的柱前反应，建立了HPLC-ECD-DAD联用技术研究绿原酸、阿魏酸和槲皮素清除羟自由基（·OH）能力的新方法，并将该方法用于中草药杜仲、紫花地丁、桑叶、白毛根和金银花等清除·OH能力的研究。研究表明，绿原酸、阿魏酸、槲皮素的半数清除浓度(IC50)顺序为：绿原酸>阿魏酸>槲皮素；每毫升含5毫克杜仲、紫花地丁、桑叶、白毛根和金银花粉末样品的50％甲醇提取液的清除率分别为：58．3％，6．5％，10．2％，8．6％，37．3％。该法为识别中药中抗氧化组分提供了一种简便而有效的途径。 4、以十二烷基磺酸钠为增敏剂，建立了测定三种中药材和两种蔬菜中芹菜素含量的反相高效液相色谱电化学的新方法。实验表明，芹菜素的线性范围为0．14～177．27μg·mL-1（r=0．9999）；回收率为96．0～103．7％（RSD≤2．5％）。与HPLC-DAD方法相比较，该方法的灵敏度更高。