生、醋莪术对大鼠原发性肝癌模型的治疗作用及对HepG2的抑制增殖作用研究

研究目的:探讨莪术对原发性肝癌的疗效及比较生、醋莪术疗效差异,进一步探究莪术作用于原发性肝癌的可能机制。研究方法和结果一 生、醋莪术的体内实验研究实验组SD大鼠适应性饲养一周后于双后肢皮下交替注射50%CCl4中性菜籽油溶液,第5周开始用灭菌自来水配制DEN溶液(避光保存,新鲜配制),供实验大鼠自由饮用,连续饮用90天,建立肝癌模型,并取部分肝组织做病理切片检测造模是否成功。于第17周开始分组灌胃给药,连续给药42天后,各组大鼠腹主动脉采血及摘取肝组织。ELISA法检测大鼠血清中AFP、AFP-L3、IL-17水平。结果表明生、醋莪术组各指标水平均高于空白对照及阳性药组,低于模型组,P<0.05;生高莪术组高于醋高莪术组,生低莪术组高于醋低莪术组,P<0.05;生低莪术组高于生高莪术组,醋低莪术组高于醋高莪术组,P<0.05。二 生、醋莪术含药血清对人肝癌HepG2细胞的体外实验研究1制备含药血清,分别为空白含药血清组、生莪术含药血清组、醋莪术含药血清组、阳性药含药血清组。2CCK-8实验观察不同浓度的生、醋含药血清(5%、10%、20%、40%)对于HepG2细胞的生长抑制作用,设置空白含药血清对照组、阳性对照组(20%环磷酰胺含药血清组),分别作用24h、48h、72h。结果按照表格列出,得出莪术作用细胞的最适含药血清浓度。3 Western-blot实验观察生、醋莪术含药血清(20%)对HepG2细胞AKT蛋白、p-AKT蛋白的影响,设置空白含药血清对照组、阳性对照组(20%环磷酰胺含药血清组)。含药血清作用于细胞48h,Western-blot实验检测HepG2细胞AKT蛋白、p-AKT蛋白水平,结果显示相比空白含药血清对照组,经生、醋莪术含药血清及阳性药含药血清处理后,生、醋莪术含药血清组AKT蛋白未有明显变化,阳性对照组AKT蛋白水平下降;生、醋莪术组及阳性药AKT蛋白的磷酸化水平明显下降,下降水平为:生莪术<醋莪术<阳性药组。研究结论:原发性大鼠肝癌模型造模成功;莪术对肝癌有疗效,但不及阳性药;醋莪术比生莪术疗效明显,高浓度比低浓度疗效佳。莪术具有抑制肿瘤细胞增殖的作用,其抑制作用可能是通过PI3K/AKT信号通路,降低AKT磷酸化水平来实现。