沙苑子多糖的分离纯化与理化性质研究

正文:沙苑子(Astragaius Compianatus R.Br)又名潼蒺藜。主要产地是陕西、河北、东北等地。具有补肝、益肾、明目、固精之功效。主治肝肾虚弱,腰膝酸痛、遗精早泄,小便频数,目暗不明等症。沙苑子用途较广,是开展综合利用的药食兼用植物资源。 为了进一步开发利用沙苑子,本论文对陕西沙苑子的主要营养成分、多糖提取工艺、分离纯化、理化性质和生物活性等方面进行了较为深入的研究,取得了以下试验成果。 沙苑子富含多种氨基酸,微量元素等营养物质,且含量互有不同。沙苑子水溶性部分测得14种氨基酸,其中谷氨基酸含量最高为68%,其次为天冬氨酸14%,并有赖氨酸、苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等7种人体必需氨基酸,这说明沙苑子具有较高的食用和药用价值。 沙苑子多糖的最佳提取工艺为:热水提取法,温度65℃,加入15倍水,浸提6h,粗多糖最高得率5.06g/kg;超声波辅助提取技术,功率300W,超声时间25min,料液比1:15(W:V),提取得率5.53g/kg,但是超声对多糖结构可能有影响;在传统Sevag法除蛋白的基础上采用Sevag法结合酶法除蛋白,大大提高了除蛋白率。 采用DEAE Sepharose CL-6B离子交换柱和Sephadex G-200凝胶柱层析分离纯化沙苑子多糖,具有较好的分离效果,共得到ACRBⅠ-a、ACRBⅠ-b、ACRBⅡ-a、ACRBⅡ-b、ACRBⅢ、ACRBⅣ六种级分。其中ACRBⅠ-a量较小不对其进行研究,由SephadexG-200柱层析结果可看出,此分离过程对ACRBⅠ-b、ACRBⅡ-a、ACRBⅡ-b、ACRBⅢ的分离作用更好。本论文对ACRBⅠ-b、ACRBⅡ-a、ACRBⅡ-b、ACRBⅢ进行了深入研究。 本试验采用SephadexG-200柱(1.1×100cm)层析法测定多糖的分子量,为了评价该法的精确性,我们将标准分子量葡聚糖T-70和T-40混合后上柱,在前述柱层析条件下获得了很好的分离效果。ACRBⅠ-b、ACRBⅡ-a、ACRBⅡ-b、ACRBⅢ分子量分别为67kD,75kD,68kD,63kD。 本试验测定多糖的溶解性时,采用单位体积水溶解一定量多糖所用的时间来表示,而没有采用溶解度来表示,这是因为多糖溶液可能形成溶胶而不能准确地评价其溶解性。 沙苑子纯多糖在120℃下进行了10h酸水解,水解完全。气相色谱分析结果表明对于沙苑子多糖,利用硫酸水解、三甲基硅醚化衍生后分析效果较好。 气相色谱,红外光谱和理化特性分析表明ACRBⅠ-b、ACRBⅡ-a、ACRBⅡ-b、ACRBⅢ均为杂多糖;ACRBⅠ-b和ACRBⅡ-a主要由葡萄糖组成;ACRBⅡ-b主要由鼠李糖、阿拉伯糖、核糖和半乳糖组成;ACRBⅢ主要由甘露糖组成。