大豆异黄酮是大豆中的主要功效成分,具有降胆固醇、抗防骨质疏松、缓解更年期综合症等多种生理活性和药理功效,可广泛应用于药品、保健食品及饮料添加剂中。本论文对市售大豆异黄酮提取物中各种异黄酮成分进行进一步分离纯化的工艺方法和条件进行了研究。
1、建立了一种利用大孔吸附树脂分离纯化四种主要的大豆异黄酮的方法。样品采用HPD-100树脂吸附后用20、25、35、45和70%的乙醇溶液梯度洗脱分离四种主要大豆异黄酮。大豆苷、染料木苷、大豆苷元和染料木素产品纯度分别为49.31、60.38、19.33和8.14%。该方法适用于对四种主要大豆异黄酮成分进行初步分离。
2、建立了一种微波快速水解大豆异黄酮糖苷的方法,探讨了大豆异黄酮微波水解的条件,并对各种条件进行了优化。与传统回流水解方法进行比较,该方法能简单,快速,高效水解大豆异黄酮,运用该方法能快速制备大豆异黄酮苷元。
3、建立了制备型高效液相色谱制备大豆苷元、染料木素单体的方法,对制备流动相配比、流速、样品上样量等制备条件进行了优化。且该方法具有生产周期短、产品质量高、方法简便等特点,产品可作为中药药效物质基础研究中的对照品。
4、建立了一种仅用水作为溶剂分离大豆异黄酮苷和苷元的方法,分别对所用溶剂、提取温度、提取时间和物料比进行了优化。实验上清液干燥后的固形物中大豆异黄酮苷含量为32.24%,苷元含量仅为3.05%,沉淀中大豆异黄酮苷元含量为72.03%,苷含量仅为4.28%。该方法经济、简单、绿色无毒,适合工业生产。