人参根HG型果胶的制备及鉴定

人参根粗多糖经淀粉酶除淀粉,Sevage法脱蛋白,80%无水乙醇醇沉后得到人参根多糖GR,之后,配成10mg/ml的水溶液,在搅拌过程中加入20%质量分数的H2SO4溶液至终浓度为0.09%,100℃水解2h,加入BaCO3中和,过滤除去不溶物,上清浓缩后,80%乙醇（v/v）醇沉过夜,4800r/min离心20min,沉淀依次用3倍体积的无水乙醇,乙醚洗3次,常规干燥后得到GRP。苯酚-硫酸法检测得GR、GRP总糖含量分别为57.90%,99.84%;间羟联苯法检测GR、GRP的糖醛酸含量为35.30%,97.31%;考马斯亮蓝法检测GRP不含蛋白质;HPLC法检测GRP的单糖组成为GalUA,痕量Gal,Ara和Glc;红外光谱检测GRP中的糖醛酸为α构型;果胶酶解和13C NMR分析表明GRP主要由α-（1→4）-D-GalUA构成,在2,3位上有由α-（1→4）-D-GalUA构成的支链。 利用果胶酶pectinex ultra SP-L（novozymes）对GRP进行水解,打断α-（1→4）-D -GalUAP ,用Sephadex G-75分离获得GRP结构中的非α-（1→4）-D–GalUA结构的精细单元,通过柱前衍生化技术使所得的单糖及寡糖片断具有紫外吸收,提高监测的灵敏度,经过HPLC的ODS柱获得部分非α-（1→4）-D–GalUA结构的精细单元的寡糖片断,通过单糖组成的测定对其精细单元进行初步分析。