家蚕和桑叶中1-脱氧野尻霉素含量变化的研究

1-脱氧野尻霉素(DNJ)及其衍生物是一种高效的α-葡萄糖苷酶抑制剂,可用于治疗糖尿病、肥胖症、病毒感染等疾病。目前已发现多种植物和微生物具有合成和积累DNJ的特性,其中以桑叶中的含量最高。家蚕一生食桑,且对DNJ具有富集作用,其体内的DNJ含量又远高于桑叶。因此DNJ是桑和蚕体中的重要生理活性物质,尤其是与其降血糖作用密切相关。但是,由于受测试方法的限制,目前对于桑叶和蚕体中DNJ含量的变化或富集规律尚缺乏系统研究。有鉴于此,本文首次建立了反相高效液相色谱-紫外检测法(RP-HPLC-UV)测定DNJ的新方法,进一步利用该方法系统研究了桑叶中DNJ含量的变化规律,以及蚕体对DNJ的富集作用,并探讨了脱脂全蚕粉的降血糖效果。旨在为筛选富含DNJ的蚕桑资源或其他生物资源、制定衡量全蚕粉和桑叶制品降血糖效果的质量指标等提供参考。主要研究结果如下: 1以0.05 mol/L HCl为溶剂提取蚕粉和桑叶粉中的DNJ,以9-芴基氯甲酸甲酯(FMOC)作为衍化剂,在pH8.5硼酸盐缓冲液中进行衍生化反应,生成具有紫外吸收的DNJ-FMOC络合物,用反相高效液相色谱-紫外检测法分离测定DNJ-FMOC。结果表明,反应产物的色谱图分离效果良好,DNJ-FMOC的峰面积与DNJ浓度呈高度正相关关系,加样回收率平均为100.7%,精密度试验、稳定性试验、重现性试验、回收率试验表明,该方法是稳定可靠的,可以作为测定家蚕、桑叶及有关药物中DNJ含量的有效方法。 2利用RP-HPLC-UV法测定了不同全蚕粉样品中的DNJ含量,发现DNJ的含量受蚕品种、饲料、饲养季节、蚕粉的加工处理方法等多种因素的影响。在供试的9个蚕品种中,菁松品种的DNJ含量最高;养蚕用叶在供试的6个桑品种中,以农桑14最佳;季节和叶位以春季适熟叶较好;桑叶中的DNJ含量与蚕体的含量呈明显的正相关关系。蚕粉的加工以饥饿、冷冻干燥或100℃烘干的样品DNJ含量较高,微波干燥最差,但干燥蚕粉用微波灭菌处理对DNJ含量影响不大。