桑葚中花色苷和西番莲中黄酮苷的分离纯化和NMR鉴定

自唐代以来,桑葚就被祖国医学用作重要的补益药,具有补血滋阴,生津润燥的作用,主要用于眩晕耳鸣,心悸失眠,须发早白,津伤口渴,内热消渴,血虚便秘等症状。花色苷是桑葚中重要的生理活性成分,故本文对桑葚中的花色苷单体成分进行分离纯化,为更深入地研究桑葚的活性及其开发利用奠定基础。 采用盐酸甲醇法从桑葚中提取花色苷,用大孔吸附树脂初步纯化后,用制备型高效液相色谱法分离纯化其中的花色苷单体,洗脱液低温真空浓缩后,采用真空冷冻干燥得到化合物1和化合物2。通过分析该二化合物的'HNMR数据,查阅文献,鉴定它们的结构,分别为矢车菊素-3-O-葡萄糖苷和矢车菊素-3-0-(6″-氧-α-鼠李糖基-β-半乳糖)苷。 含花色苷的样品在不加保护的情况下将充分降解,有一种化合物生成。本研究使用制备液相色谱技术对一种主要的花色苷降解产物进行了分离纯化。以甲醇和水为流动相体系,经两次纯化该化合物纯度可达到96.0%以上。通过'H-NMR和13C-NMR最终确定该化合物为5-羟甲基-2-呋喃甲醛。 西番莲是一种广泛种植在热带、亚热带的水果,其叶被证明中具有抗肿瘤,抗焦虑,镇静,抗菌抗炎等多种活性。黄酮类化合物是西番莲叶的主要生理活性成分,它们是天然抗氧化剂,具有清除自由基,抗衰老,提高免疫力等活性。故为了进一步研究西番莲叶的活性物质及其作用机制,本文采用高速逆流色谱法(HSCCC)从西番莲中分离黄酮碳苷。 本研究将黄果西番莲叶的60%的甲醇提取物的正丁醇萃取部分用聚酰胺柱初步纯化,收集水相部分,经浓缩后使用循环高速逆流色谱法进行分离。采用的溶剂系统为正丁醇：乙酸乙酯：水=4：1：5。循环逆流色谱分离两次后,西番莲正丁醇提取物的两种主要黄酮碳苷,使木犀草素-6,8-二葡萄糖苷和芹菜素-6,8-二-葡萄糖苷基本实现基线分离。分别收集两个色谱峰,减压浓缩后真空冷冻干燥,得化合物木犀草素-6,8-二-葡萄糖苷和芹菜素-6,8-二葡萄糖苷,采用HPLC法检测该二产物纯度,分别为95.6%和96.3%,该二化合物通过HSCCC分离纯化的回收率分别为71.87%和76.31%。结果表明循环逆流色谱法大大提高了难分离物质的分离度。该方法对普通高速逆流色谱条件下难分离的物质提供了有效途径。