加杨叶黄酮类化合物提取分离研究

杨柳科(Salicacea)杨属(Populus)为落叶乔木,广泛分布于欧、亚、北美,资源丰富。研究发现,杨树中含有药用成分黄酮类化合物,它是杨属植物的主要活性成分之一。加杨是我国广泛种植的树种,加杨叶中富含黄酮类化合物。 本论文以加杨叶为研究材料,利用物理和物理化学的原理和手段,研究了其中黄酮类化合物的提取、纯化和分析方法,涉及化学、物理、物理化学、生物物理等多个学科,主要内容包括:(1)加杨叶总黄酮粗提工艺的优化研究。采用有机溶剂提取法,用乙醇溶液对加杨叶黄酮进行了粗提,分光光度法测定其总黄酮含量,并采用正交试验方法确定了加杨叶黄酮类化合物的最佳提取工艺条件,即:提取时间60 min,乙醇浓度50%,液料比为40:1,温度80℃。在此条件下提取,能得到总黄酮12.68 mg/g,即加杨叶总黄酮含量为1.27%。(2)PEG/ (NH4)2SO4双水相体系在加杨叶总黄酮萃取分离中的应用。双水相萃取技术是近年来新发展起来的一项新的分离技术,目前一般用于生物物质如蛋白质类的分离研究,其在杨属植物天然产物提取分离方面的研究目前尚未见公开报道。本文对萃取机理进行了初步探讨,确定了萃取加杨叶黄酮的最佳双水相体系是由25%(w/w) PEG 400和12%(w/w) (NH4)2SO4组成,最优的萃取条件是:pH=9,NaCl的添加量为3.0%,温度为25℃,粗提液体积为3 mL。(3)反相高效液相色谱法分析测定加杨叶中黄酮类化合物芦丁和槲皮素。对样品的制备、流动相的选择和洗脱条件进行了多次实验摸索,初步确定加杨叶黄酮提取物中含有芦丁和槲皮素等黄酮类化合物。 杨树叶资源丰富,有着广阔的开发应用前景。本文对加杨叶中的黄酮类化合物提取分离工艺所作的优化和分析条件所作的探索,目前国内外尚未见公开报道,具有一定的创新性,无疑将为杨属植物的综合开发利用提供新的途径与依据。