杭白菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)是著名的“浙八味”之一,具有祛风明目、解毒降火、安肠胃、利血气、平肝阳、延缓衰老等活性。近年来,在品种选育上取得了突破性进展,2006-2009年先后选育出金菊1号、金菊2号、早小洋菊、迟小洋菊4个新品种,为了更好的推广新品种,进一步提升药材质量,本研究在花蕾、胎菊、幼菊、全菊4个时期,分别采摘杭白菊4个新品种药材样品,开展非挥发性活性成分、挥发性活性成分及微量元素的动态积累研究,取得了如下研究结果:
1.采用紫外可见分光光度计法测定总黄酮含量,反相高效液相色谱法测定绿原酸、木犀草苷、3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸含量。结果表明杭白菊4个新品种在不同采收时期主要活性成分含量均存在明显差异,变异规律基本一致,其中总黄酮和绿原酸含量在花蕾期最高,胎菊期次之;木犀草苷含量胎菊期最高,幼菊期次之;3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸含量胎菊期最高,花蕾期次之;单花重量从花蕾期到全菊期均显著增加,全菊最高。综合活性成分与采收时期的关系,杭白菊4个新品种均在胎菊期活性成分含量较高,且产量比花蕾期高,外形完整均匀,可作为杭白菊最佳采收时期。
2.采用水蒸气蒸馏法提取杭白菊挥发油,利用气相色谱-质谱联用仪对挥发油成分进行分离鉴定,应用面积归一化法测定各成分相对含量。结果显示杭白菊4个新品种不同采收时期的样品均鉴定出超过30种化合物,其共有成分仅有11种,分别为6-甲基-5-庚烯-2-酮、β-榄香烯、à-雪松烯、α-姜黄烯、长叶醛、á-倍半水芹烯、-环氧化古芸烯-(2)、à-红没药醇、反-长松香醇、6-异丙烯基-4,8a-二甲基-1,2,3,5,6,7,8,8a-八氢萘-2-醇及5,8,11,14-花生四烯酸。表明品种显著地影响杭白菊挥发油的成分组成及各成分含量,不同品种间化学成分组成及含量均存在差异,不同采收时期对杭白菊挥发油的成分组成及含量也存在显著影响。
3.采用湿法消化法处理样品,通过电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)、原子吸收光谱法、紫外-可见分光光度计法测定杭白菊4个新品种不同采收期的微量元素含量,结果表明杭白菊4个新品种均含有K、P、Mg、Ca等多种人体所需的微量元素,且不同品种对微量元素的积累影响不显著。杭白菊4个新品种均是K的含量最高,最高可达46.36mg.g-1,其次是P、Mg、Ca、Fe、Mn、Zn, Cu、Rb、Sr、Ni、V、Cr含量相对较低。杭白菊中各微量元素的含量因采收时间的不同存在差异。整个采收过程中,除Fe、V、Cr含量均呈增加的趋势,其余K、P、Mg、Ca等元素均呈不同程度的下降趋势或先下降后增加的趋势。随着花朵从花蕾到全菊的发育,各个采收时间所进行的代谢种类和强度不同以及各微量元素所承担的生理生化功能不同,可能导致各种微量元素在各个采收期的含量存在差异。因此通过最佳采收时期的确定有望增加人体必需的微量元素的摄入量,提高杭白菊质量,增强其疗效。