高纯度香菇多糖的分离提取及其分级研究

香菇子实体营养丰富，不仅是人们理想的美味佳肴，而且具有良好的保健功能。其中的香菇多糖，是食品、医疗、保健等行业进行产品开发的重要资源。本研究的主要内容和结果如下： 1．建立了测定香菇多糖与果胶混合物中香菇多糖含量的方法。果胶是一种可溶于水的多糖，香菇多糖的提取液中通常都含有果胶杂质。本研究建立了同时测定样品溶液中葡萄糖及葡萄糖醛酸含量的方法，该方法能够消除在测定葡萄糖醛酸过程中葡萄糖产生的干扰。通过建立的模型验证了葡萄糖和葡萄糖醛酸具有良好的加和性，证明了该方法准确可靠。 2．研究了微波法和传统热水法从香菇中提取香菇多糖的工艺。对于传统热水法，通过研究不同料液比、加热温度和加热时间，最终确定了最佳料液比为1∶20，加热温度为90℃，加热时间为3小时，多糖提取率为9.97％。对于微波法，通过研究不同料液比、微波功率、加热温度和辐射时间，最终确定了最佳料液比为1∶30，微波功率为800W，加热温度为80℃，辐射时间为15min，多糖提取率为11.78％．通过对比两种优化方法，结果发现微波法具有提取率更高，能耗低，省时等优点。 3．研究了香菇多糖分离纯化的方法。第一步分离纯化：通过用Sevage法和Sevage-酶法对香菇多糖粗品纯化进行研究，结果发现Sevage-酶法具有更高的脱蛋白质效果，其一次脱蛋白质率为92.9％，多糖中蛋白质的百分含量为19.8％，多糖损失仍然很高。为此，开发了使用CaCl2、草酸铵等试剂，经过螯合、絮凝沉淀过程的CAS方法，其一次脱蛋白质率为96.5％，多糖中蛋白质百分含量为1.22％。第二步分离纯化：对第一步分离纯化产物经过酶分解、透析和活性炭吸附过程处理，并经紫外、红外光谱扫描，分析该产物为一种不含有蛋白质、核酸、果胶等杂质的具有β-D-吡喃葡聚糖结构的香菇多糖。处理过程中，所加CaCl2质量分数为22.2％，草酸铵质量分数为1.6％，酶解条件为10％胰蛋白酶，pH7.9，温度37℃，酶解时间为5小时，透析时间为4小时，活性炭质量为样品的6％，香菇多糖回收率为5.04％。 4．对香菇多糖分级进行了初步研究。以丙酮做为介质，采用有机溶剂分级沉淀法对香菇多糖进行了分级实验，在丙酮浓度为30％和50％时，得到两组不同分子量的香菇多糖。并用粘度法测定了各组分的粘均分子量，分别为[MV]组分Ⅰ=4.25×10～5，[MV]组分Ⅱ=0.88×10～5。