中药黄芩苷对人牙周膜成纤维细胞保护作用的实验研究

目的:牙周炎是发生在牙齿支持组织的炎症破坏性疾病,可以造成牙周袋形成、附着丧失、牙槽骨吸收,导致牙齿松动,是成年人牙齿丧失的最主要原因之一。牙周炎的发生与菌斑内的细菌积聚密切相关,尤其是革兰氏阴性(G-)厌氧菌。内毒素是G-菌胞壁外膜中的脂多糖(LPS),LPS的细胞毒作用不仅直接影响着人牙周膜成纤维细胞(HPLFs)的生长与增殖,而且还能刺激巨噬细胞、单核细胞、成纤维细胞等分泌白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)等多种炎症细胞因子。因而,通过药物拮抗LPS 对HPLFs 的损伤有着重要的现实意义。黄芩是我国传统中药,其主要成分黄芩苷具有多种生理作用,如抗菌、消炎、减少抗原抗体反应和化学介质的释放量、抑制变态反应和清除超氧自由基。本实验通过体外观察黄芩苷对LPS 抑制HPLFs 的活性、LPS 损伤HPLFs 超微结构以及LPS 介导TNF-α活性的影响,从细胞水平拟证明黄芩苷对HPLFs 的保护作用,并初步探讨其可能的作用机制,为将其开发为一种防治牙周病的新药提供实验与理论根据。 方法:取正畸需要拔除的无龋、无牙周病的青少年前磨牙,无菌条件下刮取牙根中部1/3 的牙周膜组织,应用细胞培养技术培养HPLFs,常规HE 染色进行形态学观察,SP 免疫组化法波形丝蛋白、角蛋白单抗染色鉴定细胞来源,凡免