硒化乳酸菌胞外多糖免疫功能机制研究

乳酸菌胞外多糖(EPS)是乳酸菌在生长代谢过程中分泌到细胞壁外的粘液多糖或荚膜多糖,本论文从乳酸乳球菌亚种中分离纯化EPS，以二氯氧硒为硒化剂将EPS进行硒化修饰，合成硒化乳酸菌胞外多糖(Se-EPS)。 巨噬细胞广泛分布于组织中，其源自单核细胞。巨噬细胞作为宿主免疫防御阵线的重要成员,和单核细胞协同保持机体平衡，帮助机体抵御或消灭细菌，病原体，甚至肿瘤细胞。在机体的免疫系统中,巨噬细胞发挥着独特的重要作用，不仅是非特异性免疫防御系统中关键细胞之一,而且还可以参与到特异性免疫应答。脾脏是机体重要的免疫器官，也是淋巴细胞重要来源。脾脏中的淋巴细胞主要分为T、B淋巴细胞，它们在免疫系统中发挥关键作用，具有多种生物学功能，当激活为效应细胞时可以发挥细胞免疫作用，抑制或杀死靶细胞，还可以释放淋巴因子从而杀死入侵的抗原,从而发挥体液免疫作用。 本文以Se-EPS为研究对象，通过体外细胞培养法研究了Se-EPS对小鼠腹腔巨噬细胞和小鼠脾淋巴细胞的作用，探讨Se-EPS的免疫调节作用机制。主要研究成果如下： 一、Se-EPS对细胞的最佳作用时间为48h。Se-EPS可以提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红、分泌NO的能力；通过Se-EPS对小鼠多种细胞因子的作用发现，Se-EPS可以提高巨噬细胞促炎症性因子IFN-γ, IL-1, IL-6和IL-12的分泌量，而不会影响抑炎症性因子IL-10的分泌。而且Se-EPS的活性明显要优于EPS。 二、Se-EPS可以显著促进小鼠脾脏中T、B淋巴细胞的增殖。通过ELISA试剂盒检测细胞培养液中细胞因子含量发现，Se-EPS在浓度范围为100-800μg/mL时可以呈浓度依赖性促进脾淋巴细胞IFN-γ, IL-1的分泌量。Se-EPS在浓度范围为100-500μg/mL时可以呈浓度依赖性促进TNF-α，IL-2，IL-6的分泌量，在Se-EPS浓度为500μg/mL时促进作用达到最大，这一作用进一步通过从基因水平探索TNF-α，IL-2，IL-6mRNA的表达得以证明。