本文以芦笋为材料,研究了芦笋中黄酮类化合物的提取工艺条件及其纯化方法,并通过颜色反应法,紫外吸收光谱法来初步鉴定芦笋中的黄酮类化合物。
1.以芦丁为标准品,利用铝盐显色可见分光光度法,得出芦笋总黄酮的标准曲线,标准曲线的回归方程为C=0.1285A-0.0003,其相关系数r=0.9993。在提取芦笋中黄酮类物质的工艺过程中,对芦笋中黄酮类物质的常规溶剂浸提工艺条件进行筛选,结果表明:有机溶剂乙醇提取效果最好,通过四因素三水平的正交试验得出乙醇提取芦笋中黄酮类物质的最佳工艺条件为:60%的乙醇在浸提温度为80℃、料液比为1:30的条件下提取4h,在此条件下测得总黄酮得率为0.498%。
2.本研究首次采用超临界二氧化碳萃取方法对芦笋中的黄酮类化合物进行了萃取研究,实验结果显示:萃取压力30MPa;萃取温度70℃;萃取时间2h;夹带剂采用2.0mL/g于芦笋物料的75%乙醇为芦笋黄酮超临界二氧化碳萃取的最佳工艺条件,此条件下得到总黄酮比率为1.35%。与常规乙醇提取法进行比较,超临界二氧化碳萃取黄酮类化合物的得率是常规溶剂乙醇提取法总黄酮得率的2.7倍。
3.在获取黄酮粗提液后,对超临界二氧化碳萃取出的芦笋粗提液中黄酮类物质的纯化方法进行了探索,结果表明:以大孔吸附树脂AB-8为芦笋黄酮的专用分离树脂,采用吸附流速为2mL/min,洗脱流速为1.5mL/min;吸附原液pH值为6,洗脱剂浓度选择大于70%乙醇溶液,洗脱剂用量为200mL(4BV)为芦笋黄酮的最佳精制条件。纯化后的样品通过颜色反应法、紫外吸收光谱法初步鉴定黄酮类化合物,结果初步确定为黄酮类化合物中的黄酮醇类。