蜂王幼虫蛋白质酶解物的制备及抗氧化活性的研究

蜂王幼虫营养丰富,具有抗衰老、增强人体免疫力、抗疲劳、促进生长、抗氧化作用。蜂王幼虫产量大,是一种重要的昆虫资源,有很重要的开发利用价值。本研究以蜂王幼虫为实验对象,测定了蜂王幼虫的理化成分,并采用单因素实验、响应面分析等方法,对蜂王幼虫蛋白质的酶解工艺进行了优化。采用超滤、凝胶过滤等方法对蜂王幼虫酶解产物进行分离纯化,采用体外抗氧化法,测定了蜂王幼虫蛋白质酶解物的体外抗氧化活性,以期获得具有应用价值的抗氧化活性肽,为蜂王幼虫蛋白质资源的开发利用提供依据。本论文的主要结果如下： 1.蜂王幼虫冻干粉蛋白含量为62.18%,总糖为9.36%,粗脂肪为25.8%,灰分为1.16%；采用气相色谱法对蜂王幼虫脂肪酸组成及其含量进行了测定,结果表明饱和脂肪酸占总脂肪酸含量的56.81%。 2.碱性蛋白酶水解的蜂王幼虫蛋白质水解度最高,对DPPH自由基清除能力最强。碱性蛋白酶水解蜂王幼虫蛋白质的最优工艺条件为：酶解pH9.7、酶解温度51℃、酶解时间180min、酶用量0.4%,水解度为33.73%。 3.蜂王幼虫蛋白质酶解液经过1KDa和5KDa的超滤膜得到了不同分子量范围的酶解液,其中小于1KDa的产物含量最多,其抗氧化活性最强。小于1KDa的多肽段的DPPH自由基清除活性IC50值为21.86mg/mL;对Fe3+的还原能力为2.787mmol Fell/g多肽；对Fe2+的络合能力是0.41mg Na2ETDA/g多肽。 4.对小于1KDa分子量范围的蜂王幼虫蛋白质酶解产物进行凝胶层析分离得到4个峰。其中峰4的抗氧化活性最强,DPPH自由基清除活性IC50值为10.5mg/mL,对Fe3+的还原力是7.592mmol FeⅡ/g多肽；对Fe2+的络合力为0.5mg Na2ETDA/g多肽。