冬虫夏草属子囊菌纲、麦角科、虫草属,为我国特有的传统名贵中药材,其强壮滋补功能与人参、鹿茸并驾齐驱,主要分布于四川、云南、青海、西藏、甘肃、新疆、贵州、山西、湖北一带。冬虫夏草性温,味甘,具益肺肾,补精髓,止血化痰之功效。近代认为本品主治肺结核咳嗽咯血、盗汗、阳痿、遗精、腰膝疲酸等症状以及可增强身体免疫功能。虫草既养肺阴又补肾阳,为平补阴阳之品,而且药性和缓,中医认为如能长期适量服之,定有去病延寿之功效。
本文以冬虫夏草的替代品人工发酵虫草菌粉为研究对象,对虫草菌粉的活性物质及营养成分进行了系统研究,为虫草菌粉替代冬虫夏草的可行性提供了相关理论和应用基础。
1.以提高提取得率为目标,比较了超声、酶提、水浴及微波等方法提取虫草菌粉多糖的工艺,发现微波提取法较佳。然后采用正交设计优化了微波强度、固液比、提取时间等工艺参数,最终得到其最佳工艺为:火力80,固液比1:17,时间60s。抑制α-淀粉酶实验表明:用微波法提取得到的虫草多糖仍具有较强的抑制该酶活力的活性。
2.建立了虫草菌粉多糖含量测定方法。虫草菌粉先经80%乙醇回流除去杂质后沸水提取,用蒽酮-硫酸法测定其多糖含量。用精制虫草多糖测得虫草多糖对葡萄糖的换算因子。此方法简便,供试液在8h内显色稳定,重现性较好,平均回收率为99.7±0.8%,RSD为1.0%（n=3）。经测定,虫草菌粉中多糖含量为8.29%,新疆产天然虫草多糖含量为11.90%,青海产天然虫草多糖含量为7.69%。该结果说明不同产地所产天然虫草的多糖含量存在较大差异,但发酵虫草菌粉多糖就其含量而言与天然虫草并无显著差别。
3.采用HPLC对虫草菌粉中核苷类（尿苷、鸟苷、腺苷和腺嘌呤）的含量进行了测定,建立了一种快速、准确、重现性好、稳定、通用的核苷类测定的反相高效液相色谱法。其最佳色谱条件为:色谱柱Alltima C18（250mm×4.6mm,5μm）;流动相为乙腈:水=4:96;流速1.0mL/min;检测波长260nm;柱温35℃;进样量20μL。此外,对虫草酸、虫草素及麦角甾醇的含量进行了测定比较。结果表明,除了虫草素外,虫草菌粉中这几种活性成分的含量均高于所购买的两种天然冬虫夏草。
