狗牙根ISSR-PCR反应体系的建立与优化

被引：5

作者：

马涛

刘卫东

杨水莲

舒必超

刘瑞峰

谢鹏

机构：

[1] 中南林业科技大学

来源：

中南林业科技大学学报 | 2009年 / 29卷 / 01期

关键词：

草业科学; 狗牙根; ISSR-PCR; 反应体系; 优化;

D O I：

10.14067/j.cnki.1673-923x.2009.01.011

中图分类号：

S688.4 [草坪与地被植物];

学科分类号：

090711 [园林植物与观赏园艺学];

摘要：

以改良的CTAB法提取的狗牙根叶片DNA为模板,采用单因素多水平方法对狗牙根ISSR反应体系进行构建和优化,系统分析Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物和buffer这6种ISSR反应成分的浓度对扩增结果的影响,结果表明:20.0μL PCR反应体积中,20.0 ng模板DNA,0.4μmol/L引物,0.5 mmol/L Mg2+,0.05 mmol/L dNTPs,0.2 U Taq DNA聚合酶,2.0μL 10×buffer.反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性45 s,55℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,35个循环;再72℃延伸7 min,4℃保温.

引用

收藏

页码：55 / 59

页数：5

相关论文

共 13 条

[1]

克氏针茅ISSR-PCR反应体系的建立与优化 [J].

隋晓青 ;

王堃 .

草业学报, 2008, (03) :71-78

[2]

马尾松针叶DNA提取方法研究 [J].

杨模华 ;

李志辉 ;

张冬林 ;

唐效蓉 ;

张斌 ;

张党权 ;

刘儒 .

中南林业科技大学学报, 2008, (03) :39-44

[3]

4种不同广玉兰基因组DNA提取方法的比较 [J].

陈永华 ;

相阳 ;

张冬林 ;

李志辉 ;

陈亮明 ;

彭婧 ;

马倩 .

中南林业科技大学学报, 2008, (03) :45-48

[4]

枣叶片DNA的提取以及AFLP反应体系的建立 [J].

文亚峰 ;

何钢 .

中南林业科技大学学报, 2007, (03) :25-28

[5]

紫花苜蓿ISSR-PCR反应体系的建立与优化 [J].

王瑜 ;

袁庆华 .

草地学报, 2007, (03) :212-215

[6]

鸭茅ISSR反应体系的建立与优化(简报) [J].

曾兵 ;

张新全 ;

兰英 .

草地学报, 2007, (03) :290-292+295

[7]

油茶ISSR反应体系建立及优化 [J].

温强 ;

叶金山 ;

雷小林 ;

江梅 ;

黄莉莉 ;

江香梅 ;

徐林初 .

中南林学院学报, 2006, (06) :22-26+43

[8]

松树种子胚乳DNA的抽提与分析 [J].

文亚峰 ;

谭晓风 .

中南林学院学报, 2004, (04) :20-23

[9]

巨桉种源遗传多样性的RAPD分析 [J].

李志辉 ;

杨模华 .

中南林学院学报, 2003, (04) :5-9

[10]

简单重复序列区间(ISSR)引物反应条件优化与筛选 [J].

余艳 ;

陈海山 ;

葛学军 .

热带亚热带植物学报, 2003, (01) :15-19