罗非鱼肝脏中超氧化物歧化酶的提取、纯化与分析

被引：20

作者：

吴燕燕 ^{[1
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李来好 ^{[1
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郝志明 ^{[2
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岑剑伟 ^{[1
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陈胜军 ^{[1
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周婉君 ^{[1
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杨贤庆 ^{[1
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刁石强 ^{[1
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机构：

[1] 中国水产科学研究院南海水产研究所

[2] 国家食品质量监督检验中心

来源：

水产学报 | 2007年 / 04期

关键词：

奥尼罗非鱼; 肝脏; 超氧化物歧化酶; 加热法; 纯化;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q814.1 [酶的分离与提纯];

学科分类号：

100112 [医学生物化学与分子生物学];

摘要：

以奥尼罗非鱼肝脏为原料,研究加热法提取超氧化物歧化酶(SOD)的工艺条件,丙酮沉淀回收酶法和HitrapTMQ FF阴离子柱纯化Cu,Zn-SOD,并对其酶学性质进行分析。结果表明加热法提取SOD时,在缓冲液中加入10mmol.L-1CuCl2,调节pH为5.6,65℃进行加热处理,可以提高SOD粗酶的稳定性和得率,其得率为57%,粗酶比活为(2580±6)U.mg-1。对酶的酶学性质研究表明纯化后SOD比活为(4895±2)U.mg-1,SDS-PAGE电泳为单一蛋白酶带,分子量为36ku,最大紫外吸收波长为265nm。该酶在pH6.0～9.0具有较好的稳定性,在75℃以下稳定,具有较好的耐热性。氰化钾、脲素、β-巯基乙醇、H2O2、对Cu,Zn-SOD具有明显的抑制作用;EDTA浓度小于3mmol.L-1时,对Cu,Zn-SOD活性有明显增强作用,EDTA浓度大于3mmol.L-1时,对Cu,Zn-SOD活性有抑制作用;DTT的修饰使Cu,Zn-SOD活性显著增加。为进一步研究和应用罗非鱼肝脏SOD提供了基础参数。

引用

页码：518 / 524

页数：7

共 11 条

[1]

啤酒废酵母提取SOD研究 [J].