比较常规PCR与多重PCR在食物中毒致病菌检测中的应用

目的通过对常规聚合酶链反应(PCR)与多重PCR在检测6种食物中毒致病菌中的比较研究,建立一个快速、准确、灵敏、有效的针对该6种致病菌进行PCR检测的平台。方法利用6种导致患者腹泻的食物中毒致病菌的特异性序列为靶序列,设计了6对特异性引物进行PCR反应,优化并建立了PCR检测体系。结果通过实验确定常规PCR适宜的退火温度为58℃,而多重PCR适宜的退火温度为62℃;常规PCR的基因组DNA检测灵敏度可达到2×10-7ng/μl,而多重PCR的基因组DNA检测灵敏度只有2×10-6ng/μl;常规PCR比多重PCR更容易从食物中毒样品中检测出致病菌。结论 6种导致患者腹泻的食物中毒微生物完全可以在同批次中完成检测,PCR检测方法操作简单、速度快、灵敏度高、稳定性和重复性好,具有较广阔的应用前景和较大的经济与社会效益。