利用正交设计建立洋桔梗RAPD最佳反应体系

被引：4

作者：

王轶

陈崇顺

曹伟杰

王转梅

机构：

[1] 南京师范大学生命科学学院江苏省生物多样性与生物技术重点实验室

来源：

北方园艺 | 2008年 / 05期

关键词：

洋桔梗; RAPD; 正交设计;

D O I：

暂无

中图分类号：

S682.19 [];

学科分类号：

摘要：

利用正交设计法对影响洋桔梗RAPD反应的Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物和模板等主要因素的作用进行了比较分析,建立了洋桔梗RAPD的最佳反应体系:即在25μL反应体积中,10×PCR buffer为2.5μL,Mg2+浓度为2.0 mmol/L,dNTPs浓度为0.4 mmol/L,引物浓度为0.2μmol/L,模板浓度为50 ng/μL,Taq DNA聚合酶用量为1.0 U;在此基础上,比较了不同退火温度对RAPD扩增产物的影响,退火温度经筛选选定为41℃;最后再将该反应体系应用于不同引物,结果表明该优化结果具有较好的稳定性和通用性。

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页码：197 / 199

页数：3

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