荧光定量PCR溶解曲线监测HIV感染者TCRα、β链CDR3谱系漂移技术的建立

被引:4
作者
李志峰 [1 ,2 ]
宋方洲 [2 ]
冯连贵 [1 ]
周全华 [1 ]
凌华 [1 ]
张敏 [1 ]
机构
[1] 重庆市疾病预防控制中心
[2] 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室
关键词
互补决定区; 聚合酶链反应; 溶解曲线;
D O I
暂无
中图分类号
R512.91 [获得性免疫缺陷综合征(AIDS艾滋病)];
学科分类号
摘要
目的建立荧光定量PCR(FQ-PCR)溶解曲线分析技术监测人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者外周血T细胞受体(TCR)α、β链CDR3谱系漂移。方法提取HIV感染者外周血单个核细胞中的总RNA,逆转录成cDNA,设计人32个TCRAV、26个TCRBV基因家族上、下游引物,FQ-PCR扩增HIV感染者TCRAV和TCRBV基因各家族CDR3谱系,溶解曲线法分析各家族CDR3谱系的寡克隆增生,并与传统的CDR3检测技术基因扫描检测结果比较分析。结果 FQ-PCR溶解曲线分析技术与基因扫描检测结果一致,HIV感染者TCRα链和β链家族CDR3表达频率不一致,多数家族为多克隆增生的高斯分布,但出现数量不等的寡克隆增生家族。结论 FQ-PCR溶解曲线法监测HIV感染者TCRα、β链CDR3谱系漂移技术操作简单,检测成本低,可以用来监测HIV感染者外周血T细胞TCRα、β链CDR3谱系漂移。
引用
收藏
页码:1535 / 1537
页数:3
相关论文
共 6 条
[1]   慢性乙型肝炎病毒感染与免疫球蛋白、T淋巴细胞关系的探讨 [J].
莫红梅 ;
李蕾 .
国际检验医学杂志, 2011, 32 (02) :194-195
[2]   HIV特异细胞免疫研究进展及其对疫苗发展的意义 [J].
阮光萍 ;
姚翔 ;
潘兴华 .
国际检验医学杂志, 2011, 32 (01) :80-82
[3]   监测TCR CDR3漂移的免疫扫描谱型分析技术的建立与鉴定 [J].
姚新生 ;
马骊 ;
温茜 ;
邹红云 ;
阮光萍 ;
王小宁 .
中华微生物学和免疫学杂志, 2006, (06) :571-573
[4]   TCR β链CDR3谱序与疾病研究概况及进展 [J].
姚新生 .
国际免疫学杂志, 2007, (04) :240-244
[5]   Rapid detection of clonal T-cell receptor-β gene rearrangements in T-cell lymphomas using the LightCycler-polymerase chain reaction with DNA melting curve analysis [J].
Yang, XY ;
Xu, DS ;
Du, J ;
Kamino, H ;
Rakeman, J ;
Ratech, H .
JOURNAL OF MOLECULAR DIAGNOSTICS, 2005, 7 (01) :81-88
[6]  
Combination of MHC–peptide multimer-based T cell sorting with the Immunoscope permits sensitive ex vivo quantitation and follow-up of human CD8 + T cell immune responses[J] . Annick Lim,Véronique Baron,Laurent Ferradini,Marc Bonneville,Philippe Kourilsky,Christophe Pannetier.Journal of Immunological Methods . 2002 (1)