免疫磁捕获-荧光定量PCR快速检测食品中沙门氏菌

被引：7

作者：

杨小鹃

李海刚

吴清平

张菊梅

陈玲

蔡淑珍

机构：

[1] 广东省微生物研究所,省部共建华南应用微生物国家重点实验室,广东省菌种保藏与应用重点实验室,广东省微生物应用新技术公共实验室

来源：

食品工业科技 | 2014年 / 35卷 / 24期

关键词：

免疫磁珠分离; 荧光定量PCR; 沙门氏菌;

D O I：

10.13386/j.issn1002-0306.2014.24.008

中图分类号：

O657.3 [光化学分析法（光谱分析法）]; TS207.4 [食品的微生物检验];

学科分类号：

070302 ; 081704 ; 083201 ;

摘要：

建立了免疫磁珠分离(Immunomagnetic separation,IMS)联合荧光定量PCR(Real-time PCR)技术准确、快速检测食品中沙门氏菌(Salmonella spp)的方法。采用亲和纯化的羊抗沙门氏菌抗体与Dynabeads M-280磁珠制备沙门氏菌免疫磁珠,优化反应条件,建立免疫磁珠分离方法。同时根据沙门氏菌特异性ttr基因,建立Real-time PCR体系,并检测其特异性及敏感性。结果显示,沙门氏菌可产生荧光信号,而其他细菌均未见明显荧光信号。利用所建立的免疫磁捕获-荧光定量PCR(IMS-real-time PCR)方法可以检测初始含菌量最低为6.5CFU/25g的食品样品,全过程需时约8h。150份实际食品样品中,IMS-real-time PCR方法检出27份阳性样品,免疫磁珠联合XLT4平板培养法检出18份阳性样品,传统国标法检出14份阳性样品。

引用

页码：79 / 83

页数：5

共 10 条

[1] 实时荧光定量PCR法测定禽蛋中沙门氏菌 [J].

张波 ;

汪永信 .

现代农业科技, 2012, (10) :333-335+337

[2] 免疫磁捕获-实时荧光PCR快速检测鸡肉中沙门氏菌 [J].

张东方 ;

袁飞 ;

王娉 ;

胡玥 ;

陈颖 ;

葛毅强 .

食品与发酵工业, 2011, 37 (08) :142-147

[3] 定量PCR快速检测动物食品中沙门菌污染 [J].

岳昌武 ;

吕玉红 ;

刘坤祥 ;

陈泽慧 ;

白国辉 .

中国农学通报, 2009, (20) :95-99

[4] 免疫磁珠捕获-PCR检测牛乳中沙门氏菌的研究附视频 [J].

王晓闻 ;

杨永莉 .

山西农业大学学报(自然科学版), 2009, (04) :289-293

[5] 食品中沙门菌特异性二重聚合酶链反应检测方法的研究 [J].

徐晓可 ;

吴清平 ;

张菊梅 ;

周艳红 ;

邓梅清 .

卫生研究, 2008, (04) :483-486

[6] 荧光定量PCR快速检测食品中沙门氏菌方法的建立及初步应用 [J].

钟伟军 ;

赵明秋 ;

邓中平 ;

陈金顶 ;

徐艳芳 .

中国预防兽医学报, 2008, (03) :220-224

[7]

沙门氏菌富集及ELISA检测方法的研究[D]. 牛瑞江.南昌大学. 2012

[8]

Supplement 2003–2007 (No. 47) to the White-Kauffmann-Le Minor scheme[J] . Research in Microbiology . 2009 (1)

[9]

An Accelerated Method for Isolation of Salmonella enterica Serotype Typhimurium from Artificially Contaminated Foods, Using a Short Preenrichment, Immunomagnetic Separation, and Xylose-Lysine-Desoxycholate Agar (6IX Method)[J] . Tatavarthy,Aparna,Peak,Kealy,Veguilla,William,Cutting,Teresa,Harwood,Valerie J,Roberts,Jill,Amuso,Philip,Cattani,Jacqueline,Cannons,Andrew. Journal of Food Protection . 2009 (3)

[10]

Real‐time PCR method for Salmonella spp. targeting the stn gene[J] . M.M.Moore,M.D.Feist. Journal of Applied Microbiology . 2006 (2)

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