牛乳主要过敏原α-乳白蛋白基因的克隆及其原核表达载体的构建

被引:14
作者
闫浩
邬玉兰
夏立新
刘志刚
机构
[1] 深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所
关键词
牛乳; α-乳白蛋白; 基因克隆; 原核表达;
D O I
10.16357/j.cnki.issn1000-5862.2010.03.015
中图分类号
Q785 [转化及克隆];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
采用RT-PCR技术克隆牛乳主要过敏原α-乳白蛋白的全长基因,并根据序列设计带有酶切位点的特异性引物对所得cDNA的开放阅读框进行扩增,将所得基因片段克隆到PET-28a载体.结果克隆了牛乳主要过敏原α-乳白蛋白的完整基因,所克隆的基因开放阅读框全长为429 bp,编码142个氨基酸,该蛋白相对分子质量约为16 265,等电点为6.10,与理论值相符.通过与Genbank中已有序列比对分析,同源性高达100%.实现构建该基因的PET-28a原核表达载体,为牛乳主要过敏原α-乳白蛋白基因的相关研究奠定了基础.
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