康莱特注射液对吉非替尼诱导人肺腺癌A549细胞株凋亡影响的实验研究

目的探讨康莱特注射液联合吉非替尼对人肺腺癌A549细胞株增殖和凋亡的影响。方法应用MTT法计算康莱特注射液作用于人肺腺癌A549细胞株48 h的半数抑制浓度(IC50),检测康莱特注射液(5、10、20、40、80、100、160μl/ml)、吉非替尼(0.1、0.5、1.0、5、10、20、40μmol/L)以及康莱特注射液(80μl/ml)联合吉非替尼(0.1、0.5、1、5、10、20、40μmol/L)作用于人肺腺癌A549细胞株24、48、72 h的增殖抑制率;流式细胞仪Annexin V/PI双标法检测康莱特注射液、吉非替尼及两药联合作用于A549细胞48 h后的凋亡率;免疫细胞化学法检测各药物处理组作用于A549细胞48 h后FAS、AKT2蛋白表达;RT-PCR技术检测各组FAS mRNA、AKT2 mRNA的表达水平。均设未加药的A549细胞为空白对照组。结果康莱特注射液作用于人肺腺癌A549细胞株48 h的IC50为80μl/ml。康莱特注射液联合吉非替尼作用于A549细胞的增殖抑制率高于两单药组和空白对照组,且呈时间和浓度依赖性(P<0.05)。两者的联合作用在一定浓度范围内呈现出协同的抗瘤效果。流式细胞术检测显示,两药联合组的细胞凋亡率显著高于两单药组和空白对照组(P<0.05)。免疫细胞化学和RT-PCR检测显示,与空白对照组比较,康莱特组和两药联合组FAS蛋白和mRNA的表达水平均升高(P<0.05),AKT2蛋白和mRNA表达水平均下调(P<0.05)。结论康莱特注射液联合吉非替尼对人肺腺癌A549细胞株有明显的促凋亡作用,康莱特注射液可能增加人肺腺癌A549细胞对于吉非替尼的敏感性。