一种采用微波炉加热快速提取细菌DNA用于PCR扩增的方法

被引：32

作者：

王琼

唐俊妮

汤承

陈娟

刘骥

陈炼红

机构：

[1] 西南民族大学生命科学与技术学院

来源：

西南民族大学学报(自然科学版) | 2015年 / 41卷 / 02期

关键词：

微波炉加热; DNA提取; PCR扩增; 食源性病原细菌;

D O I：

暂无

中图分类号：

TS201.3 [食品微生物学];

学科分类号：

083606 [微生物发酵工程];

摘要：

利用微波加热原理,探索一种快速、简单、高效提取细菌DNA用于常规PCR快速检测的方法.在微波炉额定功率800 W条件下分别对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特氏菌、副溶血弧菌、沙门氏菌以及志贺氏菌6种常见食源性病原菌进行微波处理,离心取上清,获取细菌DNA,将样本DNA进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳进行验证.并进一步采用微波加热方法针对6种病原菌最低检出浓度和混合提取6种病原菌DNA的PCR检测进行分析.6种病原菌在微波炉中加热40-130 s的上清DNA样本均能用于常规PCR扩增.针对检出浓度的分析表明,副溶血弧菌的最低检出浓度为103cfu/ml,金黄色葡萄球菌为104cfu/ml,肠出血性大肠杆菌为105cfu/ml,肠炎沙门氏菌和福氏志贺氏菌的最低检出浓度为106cfu/ml,针对单核细胞增生李斯特氏杆菌的的最低检出浓度为107cfu/ml.进行6种混合菌微波共提取时,其中5种病原菌的特异性基因都能扩出,并且条带很亮.该微波提取方法具有快速,简单,高效的特点,能满足大部分食源性病原菌的常规PCR检测需求,大大节约了时间和成本,具有广泛的适用性,为细菌快速分子检测提供了简便手段.

引用

页码：150 / 155

页数：6

共 8 条

[1]

超声波提取牛奶中细菌DNA方法的优化 [J].