荧光素酶编码基因luc在大肠杆菌中的克隆、表达及纯化

被引：4

作者：

夏蕾 ^{[1
,2
]}

饶志明 ^{[1
,2
]}

沈微 ^{[1
,2
]}

方慧英 ^{[1
,2
]}

诸葛健 ^{[1
,2
]}

机构：

[1] 江南大学工业生物技术教育部重点实验室

[2] 江南大学生物工程学院

来源：

食品与生物技术学报 | 2008年 / 05期

关键词：

萤火虫荧光素酶; 克隆; 表达; 纯化;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

以荧光虫荧光素酶报告载体pXP2 DNA为模板,扩增得到编码萤火虫荧光素酶(LUC)的基因(luc),构建了诱导型表达载体pQE30-luc。将载体导入E.coliM15获得高效诱导表达萤火虫荧光素酶基因的重组菌M15/pQE30-luc。SDS-PAGE电泳分析显示:重组蛋白的相对分子质量为60 000,表达量占全菌胞内可溶性蛋白质的50.9%.利用表达载体pQE30上的His.Tag标记选用Ni柱纯化表达具有活性的萤火虫荧光素酶(LUC),纯化后比酶活达到1.43×109RFU/mg,纯化倍数达10.6倍,回收率为25.3%.

引用

页码：62 / 66

页数：5

共 10 条

[1] 耻垢分枝杆菌海藻糖合成酶基因TreS的克隆及其在大肠杆菌中的表达 [J].