海产品中副溶血弧菌的LAMP-HNB快速检测技术

采用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)并结合指示剂-羟基萘酚蓝(hydroxy naphthol blue,HNB)的应用,即LAMP-HNB快速检测海产品中副溶血弧菌的新方法进行了研究。首先,针对副溶血弧菌tlh基因设计特异性引物,并在反应体系中加入1μL HNB(反应浓度150μmol/L)作为反应指示剂,根据反应体系颜色变化判断反应结果,并同时将产物进行凝胶电泳验证结果,通过PCR平行实验对比,实证LAMPHNB法的反应灵敏度和特异性。结果表明,LAMP-HNB新法与PCR方法的特异性没有差异,但是,LAMP-HNB新法的灵敏度是PCR的10～100倍。经海产品实际检测验证,LAMP-HNB新法与PCR法和国标法的检测结果一致。因此,LAMP-HNB新法具有特异性强、灵敏度高、操作简便等特点,更适用于海产品处理现场的检测。