褐变菜籽分离蛋白质酶水解及乙酰化修饰研究

本文研究了用2709碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶顺序水解油菜籽分离蛋白的工艺及条件,探索了双酶水解菜籽分离蛋白H2O2氧化脱色及其乙酸酐改性的方法。实验结果表明:以稀碱提取菜籽分离蛋白,蛋白质收得率73.6%。制备的菜籽分离蛋白呈深褐色,蛋白质含量91.5%,碱甙含量0.024%,植酸含量0.32%。2709碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶在50±1℃和55±1℃、pH10.0和pH7.5、E/S(U/g)=5×103条件下水解菜籽分离蛋白60分钟,DH%达到17.15%,其中前者贡献率为59.3%,后者为40.7%。经双酶水解的菜籽分离蛋白等电点仍为pH3.5。双酶水解菜籽分离蛋白在H2O2/蛋白质(V/W)=1.25～1.5、温度≥80℃下进行H2O2氧化脱色,获得淡乳黄色的蛋白,其收得率为94.83%。脱色双酶水解菜籽分离蛋白用30%乙酸酐(V/W)在pH=9.0～9.5、温度20℃下进行乙酰化改性,获得无异味、等电点为pH4.0、清液蛋白含量18.47mg/ml的乙酰化菜籽酶水解分离蛋白。