大肠杆菌O157:H7特异基因的实时荧光定量PCR检测

被引:26
作者
胡慧 [1 ]
陈雅君 [1 ]
段志刚 [1 ]
孟振北 [2 ]
彭新然 [2 ]
张龙现 [1 ]
崔保安 [1 ]
王亚宾 [1 ]
机构
[1] 不详
[2] 河南农业大学牧医工程学院
[3] 不详
[4] 漯河出入境检验检疫局
[5] 不详
关键词
大肠杆菌O157:H7; rfbE基因; SYBR GreenⅠ; 实时PCR;
D O I
暂无
中图分类号
R450 [];
学科分类号
摘要
为建立快速、特异的检测大肠杆菌O157:H7的实时荧光定量聚合酶链式反应(real time polymerase chainreaction,RT-PCR)方法,针对大肠杆菌O157:H7的特异基因rfbE设计一对特异引物,建立SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测方法,并进行灵敏度、重复性和特异性实验,同时与常规PCR方法进行比较。结果显示所建立的SYBRGreenⅠ实时定量PCR方法可以快速、特异地检测出大肠杆菌O157:H7,细菌纯培养物中其灵敏度可达2×101CFU/mL,临床模拟污染肉样中能最低能检测到1×102CFU/mL的大肠杆菌O157:H7。与常规PCR方法相比,SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法对临床样品中大肠杆菌O157:H7的检出率大大提高。本研究建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR技术能快速准确、特异、敏感地检测大肠杆菌O157:H7。
引用
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页码:278 / 282
页数:5
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