绿色荧光蛋白标记荧光假单胞菌P303及其生存能力检测

被引：11

作者：

张霞 ^{[1
]}

张杰 ^{[1
]}

李国勋 ^{[2
]}

黄大昉 ^{[3
]}

陈中义 ^{[1
]}

机构：

[1] 中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室

[2] 河北农业大学植物保护学院

[3] 中国农业科学院生物技术研究所

来源：

植物保护学报 | 2005年 / 03期

关键词：

荧光假单胞菌; 绿色荧光蛋白; 接合转移; Southern 杂交; 定殖;

D O I：

10.13802/j.cnki.zwbhxb.2005.03.012

中图分类号：

S476 [生物防治];

学科分类号：

摘要：

构建了含有荧光假单胞菌自身启动子 PP303的中间质粒载体 pGFP。然后利用 mini-Tn5转座子,通过接合转移,将两个带有不同启动子的绿色荧光蛋白基因分别整合到荧光假单胞菌 P303染色体上,获得了在488nm 波长下发光稳定的 P303m1和 P303m3菌株。PCR 鉴定和 Southern 印迹结果均证明绿色荧光蛋白已随机插入 P303染色体。SDS-PAGE 结果表明,含有 PA1/04/03启动子的P303m3菌株 GFP 表达量低于含有 PP303启动子的 P303m1菌株,染色体标记的 GFP 表达量低于质粒标记。室内平板抑菌试验结果表明,P303m1与出发菌株 P303抑菌活性相当,对九种植物病原真菌有较强的拮抗作用。定殖、生存竞争能力研究表明,荧光假单胞菌在自然土壤中和大白菜根际都具有较强的定殖能力。P303和 P303m1在自然土壤中第60天的菌量分别为1.63×10～4和3.3×10～2cfu/g 土（湿重）,大白菜根际第50天的菌量分别为3.29×10～6和4.1×10～4cfu/g 根（湿重）。

引用

页码：280 / 286

页数：7

共 7 条

[1] 广宿主稳定表达载体pQMV和pGMP的构建 [J].