水产品中副溶血性弧菌特异性二重PCR检测方法的研究

被引:11
作者
徐晓可
吴清平
张菊梅
杨小鹃
周艳红
机构
[1] 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室
关键词
副溶血性弧菌; 二重PCR; 水产品;
D O I
10.13652/j.issn.1003-5788.2008.03.033
中图分类号
R155.3 [饮食中毒与饮食性疾病的预防];
学科分类号
摘要
建立快速检测水产品中副溶血性弧菌(Vibrio parahae-molyticus)的二重PCR方法。以副溶血性弧菌特异性基因tlh和toxR为靶基因,选择2对引物,对5株副溶血性弧菌和40株非副溶血性弧菌进行特异性检测;梯度稀释副溶血性弧菌基因组DNA,以不同稀释度DNA作PCR扩增;在鱼肉样品中以不同菌量人工污染,不同增菌时间培养,提取DNA进行PCR扩增;应用该方法对实际样品进行检测。以tlh和toxR为靶基因的两对引物对副溶血性弧菌的检出有很好的特异性。PCR检测的灵敏度在DNA水平上达到28.76pg;人工污染样品,当起始污染量为1CFU/mL时,37℃增菌培养10h即可检出。本试验一共检测了21份水产品样品,有14份检出了副溶血性弧菌。
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