利用重组E2蛋白检测BVDV血清抗体间接Dot-ELISA方法的建立

被引:6
作者
赵月兰 [1 ]
王建永 [1 ]
左玉柱 [2 ]
张磊 [1 ]
郭红斌 [1 ]
秦建华 [2 ]
杨汉春 [3 ]
机构
[1] 河北农业大学中兽医学院
[2] 河北农业大学动物科技学院
[3] 中国农业大学动物医学院
关键词
牛病毒性腹泻病毒(BVDV); E2重组蛋白; 间接Dot-ELISA;
D O I
10.16303/j.cnki.1005-4545.2009.09.003
中图分类号
S854.43 [];
学科分类号
摘要
利用大肠杆菌表达的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白作为抗原,建立了检测BVDV血清抗体的间接Dot-ELISA。最佳工作条件为:E2蛋白抗原的最适包被质量浓度2.0 mg/L(2.0 ng/点),酶标抗体的工作浓度为1∶500,血清稀释度为1∶100,3%明胶-TBS作为封闭液,封闭45 min效果最佳。通过重复性试验、交叉试验、特异性试验和稳定性试验等证明,该方法重复性好、特异性强、灵敏度高;与用BVDV全病毒为抗原的IDEXX ELISA试剂盒相比,特异性96.67%,灵敏度90%,符合率95%。应用建立的检测方法对河北省4个奶牛场采集的178份腹泻奶牛血清样本进行检测,结果BVDV血清抗体阳性率40.45%,与IDEXX ELISA试剂盒的检出率无明显差异。
引用
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页码:1093 / 1096
页数:4
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