EMA-LAMP方法快速鉴别检测单增李斯特菌

被引：4

作者：

吕淑霞

徐彬

于晓丹

金雪花

林英

机构：

[1] 沈阳农业大学生物科学技术学院

来源：

食品与生物技术学报 | 2012年 / 31卷 / 09期

关键词：

单增李斯特菌; EMA-LAMP; 快速鉴别检测; 死活细胞;

D O I：

暂无

中图分类号：

R155.5 [食品卫生与检验];

学科分类号：

100403 ;

摘要：

作者建立一种将叠氮溴化乙锭(ethidium bromide monoazide,EMA)结合环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的新分析方法(EMA-LAMP),快速鉴别检测单增李斯特菌。通过对单增李斯特菌hly基因的六个区域设计4条LAMP特异性引物,EMA-LAMP在63℃下反应1 h,检测单增李斯特菌的死活细胞。结果表明,在浓度为2.0×108CFU/mL的单增李斯特死菌悬液中,使EMA激活光解进入死细胞中且与DNA结合的最佳曝光时间至少为20 min,不抑制活菌细胞DNA的LAMP扩增的最大EMA质量浓度为10μg/mL,而抑制死菌细胞DNA的LAMP扩增的最小EMA质量浓度为4.0μg/mL;活菌细胞的检出限为20 CFU/mL。

引用

页码：951 / 956

页数：6

共 7 条

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