甘油对毕赤酵母高密度发酵表达重组水蛭素Ⅱ的影响

目的:考察甘油对毕赤酵母生长和重组水蛭素Ⅱ表达的影响。方法:在摇瓶和10L发酵罐中用含有不同浓度甘油的培养基培养毕赤酵母,测定毕赤酵母的生长和重组水蛭素Ⅱ的表达。结果:发酵培养基中初始甘油浓度为5 g/L时,毕赤酵母生长速度明显加快;补料过程中甘油浓度大于70 g/L时,毕赤酵母生长受到抑制。与不加甘油相比较,诱导表达期维持培养基中甘油浓度在5 g/L以下,重组水蛭素表达可提前4 h,诱导30 h其活性达13 000 ATU/mL,比仅用甲醇诱导时效价提高了7.7%。结论:降低初始培养基中甘油浓度有利于毕赤酵母生长,补料过程中培养基甘油浓度应维持在抑制毕赤酵母生长的浓度之下,诱导阶段培养基中少量的甘油有利于水蛭素的表达。