单抗制剂中聚山梨酯80含量气相色谱检测方法的建立

目的建立测定单抗制剂中聚山梨酯80含量的气相色谱（gas chromatography,GC）方法,并进行方法的优化及验证。方法利用优化后的聚山梨酯80水解条件,用1 mol/L的KOH溶液水解样品中聚山梨酯80,脂肪酸酯键碱水解后定量释放出单油酸,油酸经甲酯化后,采用GC法检测油酸甲酯,根据内标法对样品中聚山梨酯80进行定量分析。对建立的方法进行专属性、系统适应性、线性、精密度、准确度及稳定性验证,并检测3批抗TNFα单抗注射剂中聚山梨酯80的含量。结果当聚山梨酯80和KOH的比例为1∶1时,在40℃水解4 h,水解效果最佳。该方法系统适应性良好,检测聚山梨酯80含量具有专属性;当聚山梨酯80的进样浓度在0.1～4.0 mg/ml范围内,呈良好的线性关系,R2=0.999 9;两名实验人员制备的共12份供试品的聚山梨酯80浓度的RSD为3.72%;聚山梨酯80低、中、高3个加标浓度的平均回收率分别为105.52%、104.67%和102.51%,RSD为2.37%;处理后样品在27 h内稳定性良好。3批样品中聚山梨酯80的含量分别为1.032、1.016和1.022 mg/ml,分别为标示量的103.2%、101.6%和102.2%。结论该方法简便、准确、可靠,可用于单抗制剂中聚山梨酯80含量的测定。