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非洲猪瘟病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立
被引:16
作者:

贾云飞
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不详 不详

赵福杰
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朱静静
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王超群
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吴亚楠
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魏战勇
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河南农业大学经济与管理学院
河南农业大学牧医工程学院 不详
机构:
[1] 不详
[2] 河南农业大学经济与管理学院
[3] 不详
[4] 河南农业大学牧医工程学院
[5] 许昌海关
[6] 河南省动物性食品安全重点实验室
[7] 不详
来源:
关键词:
非洲猪瘟病毒;
P72基因;
实时荧光定量PCR;
检测;
D O I:
10.16445/j.cnki.1000-2340.20200304.003
中图分类号:
S852.651 [];
学科分类号:
摘要:
为了建立非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)快速、敏感的检测方法,根据GenBank中登录的中国流行株ASFV-SY18的P72基因,建立了SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法,并对所建立方法的灵敏性、特异性与重复性进行了验证。结果显示,所建立的非洲猪瘟病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法能有效扩增1.0~1.0×10~9 copies·μL-1的ASFV标准质粒,建立的标准曲线呈现良好的线性关系;检测灵敏度为1.0 copies·μL-1;对猪流行性腹泻病毒、猪δ冠状病毒、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒等病原不发生交叉反应,具有很好的特异性;重复性试验结果显示变异系数小于1%,重复性良好。
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