非洲猪瘟病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

被引:16
作者
贾云飞 [1 ]
赵福杰 [2 ]
朱静静 [2 ]
王超群 [3 ]
吴亚楠 [2 ]
魏战勇 [2 ,4 ]
机构
[1] 不详
[2] 河南农业大学经济与管理学院
[3] 不详
[4] 河南农业大学牧医工程学院
[5] 许昌海关
[6] 河南省动物性食品安全重点实验室
[7] 不详
关键词
非洲猪瘟病毒; P72基因; 实时荧光定量PCR; 检测;
D O I
10.16445/j.cnki.1000-2340.20200304.003
中图分类号
S852.651 [];
学科分类号
摘要
为了建立非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)快速、敏感的检测方法,根据GenBank中登录的中国流行株ASFV-SY18的P72基因,建立了SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法,并对所建立方法的灵敏性、特异性与重复性进行了验证。结果显示,所建立的非洲猪瘟病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法能有效扩增1.0~1.0×10~9 copies·μL-1的ASFV标准质粒,建立的标准曲线呈现良好的线性关系;检测灵敏度为1.0 copies·μL-1;对猪流行性腹泻病毒、猪δ冠状病毒、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病毒等病原不发生交叉反应,具有很好的特异性;重复性试验结果显示变异系数小于1%,重复性良好。
引用
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页码:69 / 73+80 +80
页数:6
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