实时荧光PCR技术快速检测食品中的蜡样芽孢杆菌

以蜡样芽孢杆菌gyrB基因作为目标基因并设计特异性引物，用95℃预变性5 min、95℃变性15 s、50℃复性30 s、72℃延伸30 s,反应45个循环为反应程序，以蜡样芽孢杆菌DNA为模板进行荧光定量聚合酶链式反应（PCR）,提出了食品中蜡样芽孢杆菌快速检测的方法，并对该方法特异性、蜡样芽孢杆菌DNA灵敏度以及活菌检出限进行验证。结果表明，该引物在分段扩增中可以实现对蜡样芽孢杆菌的快速检测，而且重复性好；以3种非蜡样芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌进行特异性试验，非蜡样芽孢杆菌均没有扩增出曲线，仅蜡样芽孢杆菌扩增出特异性曲线；蜡样芽孢杆菌DNA按10倍稀释法进行灵敏度检测，可达0.01 mg·L-1,活菌检出限为8.9×10～2CFU·mL-1。