桑叶蛋白的提取及EDTA-2Na对其浸提过程的影响

为探索非变性原理提取桑叶蛋白的最佳条件,采用Na2HPO4-柠檬酸缓冲液提取桑叶蛋白,并进行蛋白质降解速度分析。通过4因素3水平正交试验对料液比、提取时间、提取温度、浸提液pH 4个因素进行优化,以叶蛋白得率、叶蛋白提取率为指标,得到提取桑叶蛋白的最佳工艺参数。结果表明,桑叶蛋白提取的优化工艺条件为:pH 7.6,料液比1:10,提取时间25 min,提取温度15℃。因新鲜叶片打浆时会破坏细胞壁,使细胞中的蛋白质在自溶酶的作用下发生分解,导致叶蛋白的提取率降低。为进一步提高桑叶蛋白的提取率,在最佳提取条件下,在打浆前向提取液中加入一定量的EDTA-2Na作为蛋白酶抑制剂,通过观察不同浓度EDTA-2Na作用下蛋白质的降解曲线,寻找EDTA-2Na的最适浓度,最终表明5 mmol/L的EDTA-2Na可最大限度降低浸提过程中蛋白质的降解。