黑曲霉A9葡萄糖氧化酶的提取纯化

为研究葡萄糖氧化酶的酶学性质、催化机理等问题,利用黑曲霉(Aspergillus niger)A9,经发酵、破碎细胞,得到胞内葡萄糖氧化酶,然后经超滤浓缩、硫酸铵盐析、DEAE-纤维素离子交换层析、Sephadex G-100凝胶过滤分离纯化。试验结果表明:通过控制离子交换层析与分子筛层析的具体操作条件,大部分杂蛋白被除去,所得酶蛋白经PAGE电泳鉴定为单一条带,达到电泳纯。测定其比活力为1779.29U/mg,比初始发酵液提高20.13倍。建立了一套操作简单、快速且费用低廉的黑曲霉A9葡萄糖氧化酶的提纯方案。