草鱼胰岛素样生长因子-I的融合表达、纯化和抗血清制备

被引：6

作者：

叶星

白俊杰

劳海华

简清

李英华

罗建仁

机构：

[1] 中国水产科学研究院珠江水产研究所农业部热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室

[2] 中国水产科学研究院珠江水

来源：

水产学报 | 2002年 / 02期

关键词：

草鱼; 胰岛素样生长因子I; 融合表达; 纯化; 抗血清;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q959.4 [鱼纲];

学科分类号：

071002 ;

摘要：

采用PCR方法改造已克隆到的草鱼胰岛素样生长因子 Ⅰ (IGF Ⅰ )cDNA ,使其成为成熟肽cDNA并亚克隆到pGEX 4T 1载体中 ,构建草鱼IGF I融合蛋白表达质粒pGEX IGF。质粒转化大肠杆菌BL2 1菌株。该菌株经IPTG诱导可表达分子量约 34kD的特异蛋白。在不同的温度条件下分别产生以可溶性的和包涵体形式为主的特异蛋白。经 30℃诱导的菌体经溶菌酶消化、超声破碎及高速离心后 ,裂解液上清经glutathionesepharose亲和层析纯化获得高纯度的GST IGF。以此纯化的融合蛋白为抗原制备兔抗草鱼IGF I的抗血清。凝胶双扩散试验显示抗血清效价为 1∶6 4 ,说明表达产物具免疫原性

引用

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页数：5

共 10 条

[1]

免疫学及免疫学检验.[M].杨廷彬主编;.人民卫生出版社.1998,

[2]

蛋白质化学研究技术与进展.[M].夏其昌主编;.科学出版社.1997,

[3] 草鱼胰岛素样生长因子-Ⅰ基因在大肠杆菌中的表达 [J].