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用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA制备方法的比较
被引：71
作者：
剧海
梁东春
郭刚
张镜宇
机构：
[1] 天津医科大学内分泌所生化与分子生物学研究室
来源：
基金：
天津市自然科学基金;
关键词：
毕赤酵母;
DNA;
聚合酶链反应;
D O I：
暂无
中图分类号：
R346 [];
学科分类号：
摘要：
目的 :比较4种用于PCR实验的毕赤酵母基因组DNA的制备方法 ,以寻求一种稳定、简便的DNA模板制备方法 ,用于毕赤酵母重组子的分析。方法 :分别用玻璃珠法、煮沸法、煮 -冻 -煮法以及直接法制备毕赤酵母基因组DNA模板 ,在相同条件下进行PCR扩增并比较其差异。结果 :煮 -冻 -煮法与玻璃珠法制备的模板进行PCR均可取得理想的实验结果。以煮沸法制备模板作PCR时结果受所用模板浓度的影响很大 ,稳定性较差。直接法(即直接用未经处理的菌体作模板)的PCR结果随机性较大 ,实验结果最不理想。结论 :煮 -冻 -煮法所需时间少、费用低、操作简便而且结果稳定 ,是采用毕赤酵母表达系统进行PCR鉴定时制备模板DNA的首选方法
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