基于p38 MAPK/NF-κB信号通路探讨中华雪胆醇提物对盐酸/乙醇诱导的大鼠急性胃溃疡的保护作用

目的：探讨中华雪胆醇提物(HC-EE)对盐酸/乙醇(HCl/EtOH)诱导的大鼠急性胃溃疡保护作用机制。方法：采用脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞体外评价HC-EE对炎症介质生成的抑制作用；采用HCl/EtOH(以60%EtOH为溶剂，使HCl浓度为150 mmol·L-1)诱导的大鼠急性胃溃疡模型评价HC-EE对急性胃溃疡的保护作用，雄性SD大鼠随机等分为5组，即正常组、模型组、HC-EE低剂量(30 mg·kg-1,HC-EE 30)组、HC-EE高剂量(60 mg·kg-1,HC-EE 60)组及雷尼替丁(35 mg·kg-1)组，各组连续灌胃给药7 d，每天2次，末次给药30 min后，模型组及各给药组给予HCl/EtOH诱导大鼠急性胃溃疡。对各组动物进行麻醉，分离胃组织，采用电子成像技术记录大鼠胃内壁溃疡面，运用ImageJ 1.8.0计算药物的溃疡抑制率，通过苏木素-伊红(HE)和高碘酸-希夫(PAS)染色观察大鼠病理组织学变化，利用Griess法测定细胞培养液中的一氧化氮(NO)含量，酶联免疫吸附试验(ELISA)测定大鼠血清(或细胞培养液)中白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、前列腺素E2(PGE2)的水平，通过蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠胃组织磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)/p38 MAPK、p-核转录因子-κB(NF-κB)p65/NF-κB p65蛋白表达水平。结果：体外实验结果显示，HC-EE能明显下调模型细胞NF-κB信号介导的炎症介质NO，以及TNF-α、IL-1β、IL-6、VCAM-1的表达(P<0.05,P<0.01)。体内实验结果显示，与正常组比较，模型组大鼠胃组织损伤明显，溃疡面积显著增大，TNF-α、IL-6水平显著升高(P<0.01),PGE2含量显著降低(P<0.01),p38 MAPK、NF-κB p65的磷酸化水平显著升高(P<0.01)；与模型组比较，HC-EE呈剂量依赖性地改善HCl/EtOH诱导的胃组织损伤和炎细胞浸润，提高溃疡抑制率，显著减少TNF-α、IL-6的释放量(P<0.01),HC-EE 60组可以增加PGE2的含量(P<0.05)、显著抑制胃组织蛋白p38 MAPK、NF-κB p65的磷酸化水平(P<0.05,P<0.01)。结论：HC-EE可改善HCl/EtOH诱导的大鼠急性胃溃疡，其作用机制可能与抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路介导的炎症介质表达有关。