黄芪甲苷对早期骨关节炎软骨细胞基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的探讨黄芪甲苷作用于早期骨关节炎退变软骨细胞后基质金属蛋白酶（MMP）-1表达的变化。方法采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测不同浓度黄芪甲苷作用不同时间关节炎退变软骨细胞的存活率;qRT-PCR法检测黄芪甲苷不同浓度不同作用时间处理关节炎退变软骨细胞后MMP-1基因表达情况;酶联免疫吸附（ELISA）法检测黄芪甲苷处理关节炎退变软骨细胞后细胞上清液中MMP-1的表达;Western印迹检测黄芪甲苷处理后MMP-1蛋白表达。结果黄芪甲苷处理后关节炎软骨细胞存活率提高,20～100 mmol/L浓度内呈剂量依赖,黄芪甲苷用量100 mmol/L效果最佳;随着培养时间的延长,细胞的存活率增加,在12 h3 d内,第3天达到存活率最高。与对照组未经黄芪甲苷处理的软骨细胞相比,黄芪甲苷处理后的细胞中MMP-1基因表达量下降,黄芪甲苷浓度20～60 mmol/L,培养2 d内,MMP-1基因的表达量与黄芪甲苷的作用浓度与作用时间呈负相关;100 mmol/L时,第2天时MMP-1基因表达量最低。ELISA结果显示正常软骨组织中MMP-1少量表达,关节炎软骨组织中MMP-1的浓度为正常组织中的2倍,处理后正常软骨组织中MMP-1浓度并未发生变化,黄芪甲苷处理后的关节炎软骨组织中MMP-1浓度降低为处理前的0.5倍,但仍高于正常软骨组织中MMP-1的浓度。Western印迹检测结果显示正常软骨组织中MMP-1蛋白少量表达,关节炎软骨组织中MMP-1蛋白大量表达,与对照组相比,黄芪甲苷处理后软骨组织中MMP-1蛋白表达量降低,但仍高于正常骨组织。结果黄芪甲苷抑制早期骨关节炎退变软骨细胞与MMP-1表达下降相关。