大豆花粉管通道技术转化雪花莲凝集素(GNA)基因

被引:19
作者
刘德璞 [1 ]
袁鹰 [1 ]
唐克轩 [2 ]
郑培和 [1 ]
王兴智 [3 ]
刘宝 [3 ]
周正平 [1 ]
姜昱 [1 ]
孙小芬 [2 ]
肖乃仲 [3 ]
朱筱娟 [3 ]
孔祥梅 [1 ]
郝文媛 [1 ]
徐文静 [1 ]
刘娜 [1 ]
李晓辉 [1 ]
机构
[1] 吉林省农业科学院生物技术中心
[2] 上海复旦大学
[3] 东北师范大学
关键词
大豆; 转基因; GNA; 花粉管通道; 遗传; 抗蚜性;
D O I
暂无
中图分类号
S565.1 [大豆];
学科分类号
0901 ;
摘要
采用花粉管通道技术,用雪花莲凝集素基因(Galanthusnivalisagglutinin,GNA)转化吉林省主推品种吉林20号、吉林30号、吉林45号品种大豆。通过接蚜鉴定和PCR鉴定,从所获得的种子苗中筛选出转基因植株。对转基因植株的后代进行分子生物学鉴定:(1)PCR分析,转基因植株97TGR1和97TGR2的T2代表现阳性,第5代表现阳性纯合;97TGR1、97TGR2和98FD1 ̄98FD20的T3代Westernblotting检测结果证明,GNA基因在蛋白质水平有表达,最高表达量占总可溶性蛋白的0.7%;97TGR1、98TGR2和99JI45TGR2的Southernblotting检测结果显示,GNA基因已插入大豆基因组;(2)遗传学分析,97TRG1的T2代呈孟德尔3:1分离,97TGR2的T3代出现种皮颜色不规则分离。经过抗蚜性鉴定和连续的筛选,获得抗性纯系;(3)抗蚜性鉴定,转基因株的T1、T2世代转基因植株可抑制蚜虫繁殖量50% ̄90%;(4)品系鉴定,转基因大豆的抗蚜性达到农学标准抗(R)和高抗(HR)水平;大面积环境释放试验自然感蚜鉴定,转基因系蚜虫发生的高峰比对照延迟,高峰期过后群体蚜量的下降速度也比对照快。本研究认为,大豆花粉管通道技术可以利用于大豆的转基因研究和应用中,GNA基因在改良大豆的抗蚜性上是可取的。
引用
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