共 28 条
毛白杨ISSR反应体系的建立及优化
被引：25
作者：
冯夏莲
[1
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何承忠
[1
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张志毅
[1
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安新民
[1
]
杨凯
[2
]
张有慧
[3
]
机构：
[1] 北京林业大学林木花卉遗传育种教育部重点实验室
[2] 北京农学院生物技术系
[3] 山东省冠县苗圃
来源：
关键词：
毛白杨;
ISSR;
PCR;
条件优化;
D O I：
10.13332/j.1000-1522.2006.03.011
中图分类号：
S792.117 [毛白杨];
学科分类号：
摘要：
为应用ISSR技术开展毛白杨遗传变异分析、辅助育种、品种鉴定、系统进化等研究,以(GTG)6为引物,通过单因子实验分别研究了退火温度、引物浓度d、NTP浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量对毛白杨ISSR-PCR反应的影响,建立并优化了适宜于毛白杨ISSR分析的扩增体系:20μL PCR反应体系,1×Taq DNA酶缓冲液(10 mmol/L Tris--HCl,50 mmol/L KCl,0.1%Trion X-100,pH 9.0),1.5 mmol/L MgCl2,1.0 U Taq酶,10 ng模板DNA,0.2μmol/L引物,0.2 mmol/L dNTP.引物(GTG)6的最适退火温度为61℃.
引用
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