濒危树种格氏栲ISSR-PCR反应体系的建立

被引:3
作者
林义君 [1 ]
刘金福 [1 ]
潘东明 [2 ]
洪伟 [1 ]
吴则焰 [3 ]
机构
[1] 福建农林大学林学院
[2] 福建农林大学园艺学院
[3] 福建农林大学生命科学学院
基金
高等学校博士学科点专项科研基金;
关键词
格氏栲; 简单重复序列区间—聚合酶链式反应; 体系优化;
D O I
10.13324/j.cnki.jfcf.2011.02.015
中图分类号
S792.17 [锥栗(栲、槠)];
学科分类号
0829 ; 0907 ;
摘要
以濒危珍稀树种格氏栲为材料,对ISSR反应体系中的各个主要影响因子进行优化筛选。首次建立可用于格氏栲ISSR-PCR分析的反应体系:20μL PCR反应体系中包括1 ng.μL-1模板DNA,0.10 mmol.L-1dNTP,2.0μL 10×PCR buffer(缓冲液),0.2μmol.L-1引物,0.037 5 U.μL-1 Taq酶,11.3μL ddH2O,2.0 mmol.L-1 MgCl2。扩增程序:94℃预变性5 min,94℃变性30 s,复性45 s,72℃延伸1.5 min,循环34次,最后72℃延伸10 min,4℃保存。
引用
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