sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞衰老的抑制作用

被引:7
作者
马珊珊 [1 ]
崔渊博 [2 ]
姚宁 [1 ]
邢衢 [1 ]
韩康 [1 ]
宋及时 [1 ]
张彦婷 [1 ]
关方霞 [1 ,3 ]
机构
[1] 郑州大学生命科学学院干细胞研究室
[2] 郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心
[3] 郑州大学第一附属医院干细胞研究室
关键词
sirt2; 腺病毒; 人脐带间充质干细胞; 衰老;
D O I
10.13705/j.issn.1671-6825.2016.01.003
中图分类号
R329 [人体组织学];
学科分类号
100107 [人体解剖与组织胚胎学(人体解剖学、组织与胚胎学)];
摘要
目的:观察sirt2基因高表达对人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)衰老的影响。方法:扩增人sirt2 ORF序列,利用腺病毒载体构建sirt2基因高表达的重组腺病毒(p Ad-sirt2),空斑法测定病毒滴度;感染h UC-MSCs,倒置荧光显微镜下观察荧光表达情况;实验分为P3组(第3代h UC-MSCs)、P15组(第15代h UC-MSCs)和感染组(用p Ad-sirt2腺病毒感染第15代h UC-MSCs),CCK-8检测细胞增殖情况,流式细胞术分析细胞周期变化,β-半乳糖苷酶染色后检测阳性细胞率。结果:成功制备p Ad-sirt2重组腺病毒,病毒滴度为1.8×1011pfu/L;荧光观察证实Sirt2蛋白在h UC-MSCs中有效表达;与P15组相比,sirt2高表达可促进h UC-MSCs增殖,并将细胞周期阻滞在S期,β-半乳糖苷酶阳性细胞率降低(P均<0.05)。结论:sirt2基因高表达可促进h UC-MSCs增殖,延长细胞周期,并有效抑制h UC-MSCs的衰老。
引用
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