含硫氨基酸基因植物表达载体的构建及对百脉根的转化

被引：4

作者：

关宁 ^{[1
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王涌鑫 ^{[1
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李聪 ^{[1
]}

苗丽宏 ^{[1
]}

张博 ^{[2
]}

机构：

[1] 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牧草遗传育种研究室

[2] 新疆农业大学草地资源与生态自治区重点实验室

来源：

分子植物育种 | 2009年 / 7卷 / 02期

关键词：

含硫氨基酸基因; 表达载体构建; 百脉根; 转化;

D O I：

暂无

中图分类号：

S541.6 [];

学科分类号：

090503 ; 0909 ;

摘要：

在本研究中,用限制性内切酶NcoⅠ和BglⅡ从中间载体pMD18zeolin和pMD18zein上切下zeolin基因(约1600bp)和γ-zein基因(约720bp),将其定向连接在经相同酶切的质粒载体pCAMBIA1302上,构建成植物表达载体pCBzeolin和pCBzein。采用冻融法将pCBzeolin和pCBzein导入根癌农杆菌(Agrobac-terium tumefaciens)菌株LBA4404,利用该菌株转化百脉根(Lotus corniculatusL.)。经过共培养、筛选分化、再生,得到抗性植株。对抗性植株进行了PCR、RT-PCR检测表明,γ-zein和zeolin基因已经整合到百脉根基因组中,在核酸水平得到了表达。含硫氨基酸数据分析表明,转zeolin基因植株含硫氨基酸含量极显著高于转γ-zein基因植株和对照植株的含量(P<0.01),但转γ-zein基因植株与对照植株间差异不显著。

引用

页码：257 / 263

页数：7

共 10 条

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