重组AiiA蛋白可溶性表达及发酵条件优化

被引：6

作者：

杨彩云 ^{[1
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杜慈 ^{[1
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黄平 ^{[2
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温真 ^{[1
]}

毛惠民 ^{[1
]}

杨梅 ^{[1
]}

机构：

[1] 福建师范大学生命科学学院

[2] 福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心

来源：

江西农业大学学报 | 2011年 / 33卷 / 06期

关键词：

AiiA蛋白; 补料分批发酵; 条件优化;

D O I：

10.13836/j.jjau.2011218

中图分类号：

S476 [生物防治];

学科分类号：

摘要：

通过摇瓶培养确定重组工程菌E.coli BL21(DE3)-pET29a-aiiA表达AiiA蛋白可溶性表达的最优化条件,考察以牛肉膏蛋白胨为基础培养基添加不同种类的碳源、不同浓度的磷酸钾缓冲液(pH7.0)、微量元素、乙酸以及调整牛肉膏蛋白胨的比值对AiiA蛋白可溶性表达的影响,并用15 L发酵罐进行补料分批发酵,确定高密度发酵工艺条件。结果表明:优化发酵培养基为蔗糖10 g/L,牛肉膏7.8 g/L,蛋白胨31.2 g/L,NaCl 5 g/L,K2 HPO4.3H2 O 14 g/L,KH2 PO4 5.3 g/L,4 mL/L微量元素。优化后AiiA蛋白可溶性达4.31 mg/mL。在15 L发酵罐补料分批发酵培养中,诱导24 h时,发酵菌OD600达到18.5,可溶性蛋白表达量5.9 mg/mL,占AiiA总蛋白50.7%,实现了扩大培养。

引用

页码：1219 / 1227

页数：9

共 14 条

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