含有扩增内标的食品中猪肉和鸡肉成分Taqman探针实时荧光PCR检测方法的建立

被引：4

作者：

何玮玲 ^{[1
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胡序建 ^{[2
]}

程欣 ^{[1
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黄明 ^{[1
]}

周光宏 ^{[1
]}

机构：

[1] 南京农业大学食品科技学院/肉品加工与质量控制教育部重点实验室

[2] 河南省商丘市技术监督局/国家面粉及制品质量监督检验中心

来源：

中国农业科学 | 2013年 / 46卷 / 21期

关键词：

扩增内标; 检测; 实时荧光PCR; 鸡肉成分; 猪肉成分;

D O I：

暂无

中图分类号：

TS207.3 [食品分析与检验]; O657.3 [光化学分析法（光谱分析法）];

学科分类号：

摘要：

【目的】建立含有扩增内标(IAC,Internal amplification control)的用于食品中猪肉和鸡肉成分鉴别的Taqman探针实时荧光PCR检测方法。【方法】分别基于猪的beta actin基因和鸡的transforming growth factor基因设计引物和探针;考察引物和探针的特异性与灵敏度;设计并构建扩增内标,优化体系中扩增内标浓度,建立内标实时荧光PCR体系;使用该检测体系对鲜肉和熟肉来源的DNA模板进行检测评价;应用该体系对市售38份样本进行盲样检测。【结果】含有扩增内标的Taqman探针实时荧光PCR体系能有效地进行食品中猪肉和鸡肉成分的快速检测,非目标物种在40个循环内均无出现扩增,检出限均为0.5 ng DNA;该体系对鲜肉和熟肉来源的DNA模板检测无显著差异;对市售食品样本的鉴别验证了方法的实用价值。【结论】该方法准确稳定,可用于食品中猪肉和鸡肉成分的快速检测。

引用

页码：4578 / 4585

页数：8

共 19 条

[1] 食品中4种肉类成分多重PCR的快速鉴别方法 [J].

何玮玲 ;

张驰 ;

杨静 ;

黄明 ;

杨军 .

中国农业科学, 2012, 45 (09) :1873-1880

[2] 多重实时荧光PCR检测牛、山羊和绵羊源性成分 [J].

曾少灵 ;

秦智锋 ;

阮周曦 ;

花群义 ;

卢体康 ;

吕建强 ;

陈书琨 ;

曹琛福 ;

张彩虹 ;

孙洁 ;

陈兵 ;

吴绍精 .

生物工程学报, 2009, (01) :139-146

[3] 扩增内标在沙门氏菌PCR检测方法中的应用 [J].

刘斌 ;

史贤明 .

微生物学通报, 2006, (02) :156-161

[4]

PCR amplification of repetitive sequences as a possible approach in relative species quantification[J] . N.Z. Ballin,F.K. Vogensen,A.H. Karlsson.Meat Science . 2011 (2)

[5]

Species determination – Can we detect and quantify meat adulteration?[J] . Nicolai Z. Ballin,Finn K. Vogensen,Anders H. Karlsson.Meat Science . 2009 (2)

[6] Development of an assay for rapid identification of meat from yak and cattle using polymerase chain reaction technique [J].

Yin, R. H. ;

Bai, W. L. ;

Wang, J. M. ;

Wu, C. D. ;

Dou, Q. L. ;

Yin, R. L. ;

He, J. B. ;

Luo, G. B. .

MEAT SCIENCE, 2009, 83 (01) :38-44

[7] SYBR-Green real-time PCR approach for the detection and quantification of pig DNA in feedstuffs [J].

Martin, Irene ;

Garcia, Teresa ;

Fajardo, Violeta ;

Rojas, Maria ;

Pegels, Nicolette ;

Hernandez, Pablo E. ;

Gonzalez, Isabel ;

Martin, Rosario .

MEAT SCIENCE, 2009, 82 (02) :252-259

[8] Identification of meat species by TaqMan-based real-time PCR assay [J].

Kesmen, Z. ;

Gulluce, A. ;

Sahin, F. ;

Yetim, H. .

MEAT SCIENCE, 2009, 82 (04) :444-449

[9] Polymerase chain reaction assay for identification of chicken in meat and meat products [J].

Mane, B. G. ;

Mendiratta, S. K. ;

Tiwari, A. K. .

FOOD CHEMISTRY, 2009, 116 (03) :806-810

[10]

Fraud identification in industrial meat products by multiplex PCR assay[J] . S. Ghovvati,M.R. Nassiri,S.Z. Mirhoseini,A. Heravi Moussavi,A. Javadmanesh.Food Control . 2008 (8)

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