酶联免疫吸附结合荧光分析法测定乳粉加速贮藏过程中的褐变产物

在65℃封闭的加速贮藏条件下,对3种不同类型乳粉(全脂乳粉、脱脂乳粉和酪乳粉)的褐变产物——末端糖基化产物(AGEs)进行研究和检测。在确立酶联免疫吸附(ELISA)法测定末端糖基产物含量的基础上,结合荧光分析测定乳粉中蛋白末端糖基化所产生的荧光物质。结果表明:AGEs产生的荧光物质和AGEs含量随着贮藏时间的延长而增加。酶联免疫吸附法采用初级抗体和酶标二抗稀释倍数均为2500倍时可以有效测定褐变乳粉中AGEs含量,其中加速贮藏20d后乳粉中AGEs含量最高,可达到0.61ng/mL。最低检出质量浓度达到0.006ng/mL,最大误差率在5%左右,重复性良好。因此,乳粉褐变的荧光强度和AGEs含量的ELISA检测可以作为评价乳粉质量的有效方法。